本发明公开了一种乙型脑炎E重组蛋白，所述的乙型脑炎E重组蛋白包括乙型脑炎E重组蛋白1和乙型脑炎E重组蛋白2，所述乙型脑炎E重组蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述乙型脑炎E重组蛋白2的氨基酸序列如本发明同时公开了一种乙型脑炎亚单位疫苗，所述的疫苗含有所述的乙型脑炎E重组蛋白1或乙型脑炎E重组蛋白2。本发明制备的乙型脑炎E重组蛋白1和乙型脑炎E重组蛋白2均具有良好的免疫原性，且乙型脑炎E重组蛋白2较乙型脑炎E重组蛋白1具有更好的免疫原性。因此，本发明公开的这2个乙型脑炎E重组蛋白均可以作为乙型脑炎亚单位疫苗的重要的备选抗原，为乙型脑炎亚单位疫苗的研发提供重要的参考和借鉴。
本发明提供了一种增加植物细胞重组蛋白胞外分泌的方法。具体包括以下步骤：1)分别构建含有EXO基因的表达载体和含有编码重组蛋白的基因的表达载体，或者构建含有EXO基因和编码重组蛋白的基因的共表达载体；2)转化植物细胞以分泌表达重组蛋白；其中，所述EXO基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述编码重组蛋白的基因的核酸序列包括编码连接在重组蛋白的N端的分泌型信号肽的核酸序列。本发明首次发现EXO基因可实现定位于内质网和胞外的重组蛋白的运输，实现重组蛋白的胞外分泌；EXO基因和编码重组蛋白的基因同时转化植物细胞，起到协同作用，提高了重组蛋白的产量和分泌率。
本发明公开了一种犬瘟热病毒H蛋白重组蛋白以及再此基础上筛选合成的融合蛋白，所述的重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明同时公开了一种疫苗，所述的疫苗含有所述的重组蛋白或所述的融合蛋白；所述的疫苗同时含有所述的重组蛋白和所述的融合蛋白，所述的重组蛋白和融合蛋白的质量比为1:1。本发明公开的重组蛋白和融合蛋白均具有良好的免疫原性，且同时使用重组蛋白和融合蛋白制备疫苗，具有比单独使用更好的免疫原性。因此，本发明公开的重组蛋白和融合蛋白均能够作为犬瘟热病毒亚单位疫苗的备选抗原，为犬瘟热病毒亚单位疫苗的研发提供了重要参考。
